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超臨界二氧化碳萃取是以超臨界二氧化碳流體代替常規(guī)有機溶劑對中藥有效成分進行萃取和分離的一種新型技術(shù)。
超臨界二氧化碳萃?。⊿FE-CO2)具有選擇性好、操作溫度低、能較好保存中藥有效成分不被破壞、不發(fā)生次生化、萃取能力強、提取效率高、具有抗氧化和滅菌作用、有利于保證和提高產(chǎn)品質(zhì)量,經(jīng)藥理和臨床證明,其藥效和臨床療效均能夠很好的保證。我們分別對30余種含揮發(fā)油的中藥做了SFE-CO2萃取和水蒸汽蒸餾法比較,SFE-CO2法出油率比水蒸汽蒸餾法提高3.8-11.4倍,油的質(zhì)量也有提高。如水蒸汽蒸餾法收集的香附油為淡黃色油狀液體,缺乏香附的特征香氣,SFE-CO2萃取的香附油在常溫下為橙黃色,具有明顯的香附特征香氣,且有效成分香附子烯(Cyperene)絕對量大于水蒸汽蒸餾法。傘形科的白芷、當歸、川芎、藁本、柴胡等藥材均含揮發(fā)油,但工業(yè)化生產(chǎn)水蒸汽蒸餾法揮發(fā)油收得率非常低。SFE-CO2萃取當歸揮發(fā)油收率為1.5%,而水蒸汽蒸餾揮發(fā)油收得率為0.01%。SFE-CO2萃取川芎,揮發(fā)油收得率為3.75%,而水蒸汽蒸餾法收得率僅為0.015%。經(jīng)氣質(zhì)聯(lián)用分析,兩種方法所制得的中藥配方顆粒揮發(fā)性成分也有差異,SFE-CO2法制得顆粒中藁本內(nèi)酯(Ligustilide)絕對量大于水蒸汽蒸餾法。
丹參酮IIA是丹參酯溶性有效成分之一,藥典規(guī)定其藥材含丹參酮IIA(C19H18O3)不得少于0.2%,采用乙醇提取,丹參酮IIA檢出的陰性率較高,這主要是丹參醇提取液經(jīng)各工序處理制成干膏粉后,丹參酮IIA已發(fā)生化學降解,降解速度與水、熱密切相關(guān),采用SFE-CO2萃取,有效成分含量高、雜質(zhì)含量少,其萃取物中丹參酮IIA的含量平均大于20%。羥基萘醌總色素是新疆紫草中的脂溶性成分之一,藥典規(guī)定其藥材中含羥基萘醌總色素以左旋紫草素(C16H16O5)計,不得少于0.8%,SFE-CO2萃取效率高,萃取物色澤紫紅。脫水穿心蓮內(nèi)酯(C20H28O4)和穿心蓮內(nèi)酯(C20H30O5)是穿心蓮中的有效成分,藥典規(guī)定其藥材中二者的總量不得少于0.8%。穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯遇熱不穩(wěn)定,水、醇提取都容易破壞,SFE-CO2萃取穿心蓮,萃取物中內(nèi)酯含量達19%,脫水內(nèi)酯12%。
超臨界二氧化碳萃取藥物中揮發(fā)性、脂溶性、熱敏性的有效成分,具有非常大的優(yōu)越性。我們對28個含親脂性、熱敏性成分的品種進行SFE-CO2萃取,提高了配方顆粒的品質(zhì)、臨床療效,質(zhì)量穩(wěn)定、標準容易控制。對于當歸等既含水溶性成分又含脂溶性有效成分的藥材,我們選擇不同產(chǎn)地、不同批次的藥材,采用水提取和超臨界二氧化碳萃取相結(jié)合的提取工藝,顆粒經(jīng)氣相色譜(GC)法,獲得揮發(fā)油指紋圖譜,水溶性成分以高效液相色譜法(HPLC),獲得水溶性成分的指紋圖譜,統(tǒng)計色譜峰,將它們作為化學特征變量,分別以藁本內(nèi)酯和阿魏酸為參照物,將所獲得數(shù)據(jù)進行系統(tǒng)分析,制定當歸配方顆粒標準指紋圖譜,以此指紋圖譜鑒定和評價不具備飲片外形后當歸配方顆粒的真?zhèn)蝺?yōu)劣,具有全面性和先進性。